Dilución seriada

OBJETIVO:

Esta práctica tiene como objetivo preparar una solución con una concentración mayor y hacer diluciones sucesivas a partir de ésta solución madre para llegar a la concentración deseada. Esto se suele usar en casos de disoluciones con concentraciones muy bajas de soluto.



FUNDAMENTO:

Esta práctica consiste en una serie de diluciones sucesivas a partir de una dilución mayor (dilución madre) para alcanzar una concentración deseada que es tan baja que es muy difícil conseguir con otros medios. En nuestro caso, también utilizamos el espectrofotómetro para calcular la curva de espectrofotometría y comprobar si está dentro del rango determinado.



MATERIALES:

• 4 o más tubos de ensayo
• 4 o más, (dependiendo del número de tubos) pipetas para vertir en cada tubo, para no mezclar y cambiar la concentración de las muestras.
• 1 matraz aforado.
• 2 vasos de precipitados
• 4 o más cubetas para el espectrofotómetro y contener las muestras.
• 1 Embudo.
• Cristal de violeta u otra sustancia para la solución.
• Agua destilada

PROCEDIMIENTO:

Podemos observar en cada tubo como consecutivamente la solución es menor

1. Determinar la cantidad apropiada de líquido de dilución. El líquido en el cual vas a diluir la sustancia es muy importante. En nuestro caso, sería el agua destilada.
2.  Preparamos varios tubos de ensayo con 9 ml de líquido de dilución (es recomendable rotularlos por orden para facilitar la práctica). Estos tubos nos servirán como espacios de dilución. En el primer tubo, agregamos la muestra sin diluir y en los siguientes, iremos haciendo diluciones en serie.
3. Preparamos el tubo con la solución (la madre) y el resto de tubos con el agua destilada.
4. Realizamos la primera dilución, mezclamos con una de las pipetas el contenido de la dilución madre. En un tubo con 9 ml de dilución introducimos 1 ml de solución (en agua destilada mezclamos cristal de violeta).
5. Realizamos la segunda dilución, Para la  segunda dilución seriada deberás tomar  1 ml de solución del segundo tubo y agregárselo a los 9 ml de líquido de dilución del tercer tubo.
6. Repetimos todo este proceso hasta llegar hasta el último tubo de ensayo, en ese momento ya habremos alcanzado la solución deseada.
7. Tras terminar este proceso, con una pipeta movemos cada sustancia de cada tubo a una cubeta diferente, bien rotulada para no perder el orden.
8. Colocamos cada cubeta en el espectrofotómetro y realizamos el estudio de la curva de espectrofotometría.

                                           

RESULTADOS:

Si realizamos todo este proceso de una forma correcta, podremos terminar con la cantidad de solución que estamos buscando al realizar esta práctica, y en nuestro caso, podremos utilizar el espectrofotómetro para realizar el estudio de la curva de espectrofotometría y comprobar si la solución está dentro del rango determinado.

Con los datos recibidos tras la prueba con el espectrofotómetro, podemos realizar una gráfica en la cuál podemos comprobar que todo esta correcto, ya que podemos observar que a más concentración de la dilución, más absorción de luz hay. Con lo que, por cada tubo de ensayo que comprobemos, veremos que irá descendiendo la concentración y por tanto la absorción, debido a la dilución seriada.


PRECAUCIONES:

• Al realizar esta práctica, debemos realizarla en una zona de trabajo limpio y ordenado, para que no haya distracciones ni dificultades para llevarlo a cabo.
• Debemos utilizar bata de laboratorio y protección, como guantes. Ya que se usan sustancias que pueden manchar.
• Todo recipiente debe estar lavado y secado adecuadamente para que no interfiera en los resultados finales.
• Todos los recipientes deben estar rotulados y señalizados de una forma correcta para facilitar todo el proceso.
• A la hora de usar las cubetas, debemos tener cuidado para no mancharlas, ya que el espectrofotómetro es muy sensible.
• A la hora de usarlo, debemos calibrar y comprobar el funcionamiento correcto del espectrofotómetro.