Dilución doblada

OBJETIVO:

Esta práctica, la cual es muy parecida a la práctica de la dilución seriada, tiene como objetivo preparar una solución con una concentración mayor y hacer diluciones sucesivas a partir de ésta solución madre para llegar a la concentración deseada. Esto se suele usar en casos de disoluciones con concentraciones muy bajas de soluto.



FUNDAMENTO:

Esta práctica consiste en una serie de diluciones sucesivas a partir de una dilución mayor (dilución madre) para alcanzar una concentración deseada que es tan baja que es muy difícil conseguir con otros medios. Al ser una dilución doblada, se diluye bastante menos la muestra, manteniendo siempre una concentración que se divide entre dos por cada tubo que va pasando. Tras esto, el proceso es exactamente el mismo, colocamos la muestra de cada tubo en una cubeta debidamente señalizada y rotulada para analizarla en el espectrofotómetro y estudiar su curva de espectrofotometría.



MATERIALES:

Utilizamos los mismos materiales que utilizaríamos en una dilución seriada:

• 4 o más tubos de ensayo
• 4 o más, (dependiendo del número de tubos) pipetas para vertir en cada tubo, para no mezclar y cambiar la concentración de las muestras.
• 1 matraz aforado.
• 2 vasos de precipitados
• 4 o más cubetas para el espectrofotómetro y contener las muestras.
• 1 Embudo.
• Cristal de violeta u otra sustancia para la solución.
• Agua destilada

PROCEDIMIENTO:

1. Determinar la cantidad apropiada de líquido de dilución. El líquido en el cual vas a diluir la sustancia es muy importante. En nuestro caso, sería el agua destilada.
2.  Preparamos varios tubos de ensayo con 5 ml de líquido de dilución (es recomendable rotularlos por orden para facilitar la práctica). Estos tubos nos servirán como espacios de dilución. En el primer tubo, agregamos la muestra sin diluir y en los siguientes, iremos haciendo diluciones en serie.
3. Preparamos el tubo con la solución (la madre) y el resto de tubos con el agua destilada.
4. Realizamos la primera dilución, mezclamos con una de las pipetas el contenido de la dilución madre. En un tubo con 5 ml de dilución introducimos 5 ml de solución (en agua destilada mezclamos cristal de violeta).
5. Realizamos la segunda dilución, Para la  segunda dilución seriada deberás tomar  5 ml de solución del segundo tubo y agregárselo a los 5
6. ml de líquido de dilución del tercer tubo.
7. Repetimos todo este proceso hasta llegar hasta el último tubo de ensayo, en ese momento ya habremos alcanzado la solución deseada.
8. Tras terminar este proceso, con una pipeta movemos cada sustancia de cada tubo a una cubeta diferente, bien rotulada para no perder el orden.
9. Colocamos cada cubeta en el espectrofotómetro y realizamos el estudio de la curva de espectrofotometría.

Podemos observar la diferencia entre esta dilución y la seriada, como en esta se nota más el cambio progresivo de disolución.

                                           

RESULTADOS:


Al terminar todo, si hemos realizado todos estos pasos de una forma correcta, al igual que con la dilución seriada, habremos alcanzado la cantidad de solución que buscábamos. En nuestro caso, también utilizaremos el espectrofotómetro para observar, al igual que con la otra dilución, la curva de espectrofotometría y así estudiarla, comprobar que la solución está dentro del rango determinado y compararla con los resultados de la dilución seriada.

Con los datos recibidos con la prueba del espectrofotómetro, realizamos una gráfica en la cual podemos comprobar que todo esta correcto, ya que podemos comprobar que a más concentración de la dilución, más absorción de luz hay. En este caso, como se trata de una dilución doblada, podemos observar como el progreso es más importante, es decir, se nota más.


PRECAUCIONES:

• Al realizar esta práctica, debemos realizarla en una zona de trabajo limpio y ordenado, para que no haya distracciones ni dificultades para llevarlo a cabo.
• Debemos utilizar bata de laboratorio y protección, como guantes. Ya que se usan sustancias que pueden manchar.
• Todo recipiente debe estar lavado y secado adecuadamente para que no interfiera en los resultados finales.
• Todos los recipientes deben estar rotulados y señalizados de una forma correcta para facilitar todo el proceso.
• A la hora de usar las cubetas, debemos tener cuidado para no mancharlas, ya que el espectrofotómetro es muy sensible.
• A la hora de usarlo, debemos calibrar y comprobar el funcionamiento correcto del espectrofotómetro.